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Product Center品牌 | 其他品牌 | 货号 | D2070 |
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DiR小动物活体成像荧光试剂
产品货号:D2070
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产品名称: DiR (DiIC18(7)1,1’-dioctadecyltetramethyl indotricarbocyanine Iodide)
分子式/分子量: C63H101IN2=1013.4
最大吸收波长/发射波长: 748/780 nm
推荐滤光片设置:710ex/760em
结构式:
图 1 。取自脾脏的T细胞用DiR进行荧光染色,然后以5×106个细胞/只小鼠的剂量经静脉注射到Nu/Nu小鼠体内。图中显示的是注射后24小时用IVIS Spectrum拍摄的图像,显示细胞向脾脏迁移。
DiR染料是亲脂性的近红外花菁荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。18个碳的长链插入细胞膜中从而对细胞进行染色,而细胞间的染料转移可以忽略不计。DiR的发射的是近红外荧光可以穿透细胞和组织,在活体成像中用来示踪。DIR一般对原代细胞进行荧光染色并可进行活体成像分布观察,(例如下列细胞embryonic stem cells, bone marrow derived stem cells, adipose derived stem cells, lymphocytes and erythrocytes)
图2:将25毫克DiR溶解在3毫升乙醇中制备DiR溶液。将199微升的DiR溶液稀释在5毫升PBS中制备320微克/毫升的工作溶液。从脾脏分离出的T细胞用320微克/毫升的DiR溶液孵育30分钟。在4℃下以1000转/分钟离心3分钟,形成蓝色沉淀。用PBS清洗两次,然后将5×10^6个细胞通过静脉注射注入小鼠体内。对照组用PBS注射5×10^6个细胞。在注射后10分钟、1小时、6小时和24小时,用IVIS光谱仪对小鼠进行成像。DiR成像的理想滤光片设置为710纳米激发和760纳米发射。在所有时间点,小鼠均从背部和腹部进行成像。在注射后24小时,将大脑、骨骼、脾脏、肝脏、肺部和肾脏取出进行体外成像。
非侵入性体内成像技术能够实时显示注射入体内的T细胞向肝脏和脾脏的归巢过程,这一过程在体外成像中也得到了证实。