Nt.BspQI 切刻内切酶: Nt.BspQl 是一种切刻内切酶，仅切割 dsDNA 底物的一条链，在dsDNA 底物上产生切口，而不切开 dsDNA。

货号：F3512S

储存条件：-20℃

产品组成：

产品简介：

Nt.BspQl 是一种切刻内切酶，仅切割 dsDNA 底物的一条链，在dsDNA 底物上产生切口，而不切开 dsDNA。

建议反应条件：1x Cut Buffer，50°C温育；参照“DNA 酶切流程"配制反应体系。

本品在 37°C进行酶切反应时，有 100%的活性。

失活条件：80℃温育 20 min。

活性定义

1个活性单位(U)是指在 50 μl 反应体系中，50℃ 1h内完quan酶切1μg 超螺旋pUC19 DNA 转化成开环形式所需的酶量。

质量控制

超长时间温育检测

将10 U Nt.BspQl与超螺旋 pUC19 DNA 底物在 50'C温育 16 h,通过琼脂糖凝胶电泳检测开环DNA无变化。

RNase 残留检测

将10 U Nt.BspQl与 500 ng RNA 在 37°C温育1 h，使用琼脂糖凝胶电泳检测超过 90% 的 RNA 仍保持完整。

使用方法

1. DNA 酶切流程

1）在冰上按如下建议的加样顺序配制反应体系：

a. DNA 底物中应不含苯fen、氣仿、乙醇、EDTA、洗涤剂或高浓度盐，否则将会影响Nt.BspQI酶活性;

b. 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋)，然后瞬时离心以收集挂壁液滴；

2）50℃温育 30 min~1 h；

3）80°C温育 20 min 即可使酶失活，停止反应，或者通过吸附柱或苯fen/氯仿纯化终止反应。

2.注意事项

1）反应体系中加入的酶体积不应超过总体积的 10%，避免酶中过多的甘油引起星号活性；

2）限制性内切酶存储缓冲液中的添加剂(例如甘油、盐)与底物溶液中的污染物(例如盐、EDTA 或乙醇等)相同，反应体积越小，酶切反应抑制效应越强。

不同DNA中的酶切位点数量

甲基化修饰影响