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Product Center品牌 | LABLEAD | 供货周期 | 现货 |
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应用领域 | 食品/农产品,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
3xFlag peptide
货号:F1002
存储条件:-20ºC保存,至少一年有效。粉末装也可以4ºC保存,一年有效。
产品简介
3X Flag Peptide (3X Flag多肽)是一种常用于通过竞争性结合Anti-Flag抗体,从而在免疫沉淀时洗脱与Anti-Flag抗体结合的Flag融合表达蛋白的多肽。本产品用于免疫沉淀时Flag融合表达蛋白的洗脱。3X Flag Peptide (3X Flag多肽)由23个氨基酸组成,含有3组Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp重复多肽。在C端的8个氨基酸组成经典的Flag标签(Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys; DYKDDDDK)。
3X Flag Peptide (3X Flag多肽)的主要参数
别名 | Poly Flag Peptide; ddddk肽; dykddddk肽 |
描述 | 3X Flag Peptide consists of 23 amino acids. The 8 amino acids at the C-terminus form the classic Flag tag. 3X Flag Peptide is a synthetic polypeptide containing three repeats of the DYKXXD amino acid sequence |
纯度 | ~98% by HPLC analyse |
分子式 | C120H169N31O49S |
分子量 | ~ 2862 |
序列 (Three-Letter Code) | Met-Asp-Tyr-Lys-Asp-His-Asp-Gly-Asp-Tyr-Lys-Asp-His-Asp-Ile-Asp-Tyr-Lys-AspAsp-Asp-Asp-Lys |
序列 (One-Letter Code) | MDYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK |
来源 | 合成 |
溶剂 | TBS (50mM Tris-HCl, pH7.4, 150mM NaCl) |
使用说明:
1、粉末装由于微量的多肽在冻干过程中沉积在管内,形成很薄或不可见的多肽层,所以在打开管盖前,建议在离心机中约8,000-12,000×g离心10-30秒,使附着在管盖或管壁上的多肽聚集于管底。
2、溶解时使用TBS进行溶液,用移液枪的枪头轻吹几下或者轻轻摇晃瓶子,即可使多肽wan全溶解。请勿用vortex剧烈振荡,以免多肽变性而失活;溶液装可直接用于后续配制。
3、免疫沉淀样品的3X Flag竞争洗脱法:本方法为非变性法,洗脱效率高且洗脱后的样品中不含Flag抗体的轻链和重链。
3.1 3X Flag多肽洗脱液的配制:根据样品量确定洗脱液的用量,取一定量3X Flag多肽储存液用TBS溶液进一步稀释3X Flag多肽溶液至150μg/ml。
3.2 每个免疫沉淀样品加入100μl 3X Flag多肽洗脱液(150μg/ml),冰浴并摇晃孵育30分钟-2小时,为了提高洗脱效率,可延长孵育时间或重复洗脱。3X Flag多肽洗脱液体积一般为凝胶悬液的5倍。
3.3 4ºC,6000×g离心30秒,小心转移上清至新管中,上清即为洗脱的Flag融合蛋白。注意不要吸到凝胶。
3.4 洗脱的Flag融合蛋白置于4ºC待用,或者-20ºC长期保存。