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  • 20259-19
    WB实验-基础篇

    WB实验即蛋白质印迹法,是分子生物学、生物化学等领域常用的实验技术。它依据抗原抗体的特异性结合原理,能对样品中的特定蛋白质进行定性或半定量分析。WB实验凭借高特异性和灵敏度,在蛋白质表达水平研究、蛋白质分子大小鉴定、疾病标志物检测等方面发挥着重要作用,是生命科学研究中不ke或缺的有力工具。实验原理WB实验基于抗原-抗体的特异性结合反应,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质,将其转移至固相载体(如PVDF膜),再利用特异性一抗和酶标记二抗进行检测,最终通过化学发光或显色反应实现目标...

  • 20259-19
    IP/CO-IP常见问题

    IP/COIP常见问题1、设置实验对照阳性对照:input,即裂解后的上清,判断目的蛋白是否表达。阴性对照:和ip抗体同型的IgG。2、抗体、样本、beads的加入顺序①抗体先与蛋白结合,再加入beads;②抗体先与beads孵育,最后加入蛋白;③抗体、样本和beads同时加入。一般情况下①和②相差不大,如果蛋白量过高,比如大于1000ug,建议使用第二种,否则蛋白容易吸附在磁珠上,降低得率。3、beads磁珠和琼脂糖珠如何选择琼脂糖珠:需要离心,操作繁琐;吸走上清时容易吸走...

  • 20259-15
    DAB显色试剂盒操作步骤及注意事项

    DAB显色试剂盒是一种基于辣根过氧化物酶(HRP)催化反应的显色试剂盒,广泛应用于免疫组化、原位杂交、WesternBlotting、SouthernBlotting、NorthernBlotting及EMSA等实验中,用于检测HRP标记的抗体或探针结合的靶标。DAB显色试剂盒操作步骤(以组织切片为例)样本准备:组织切片经抗原修复、封闭后,与HRP标记的抗体孵育。洗涤:用TBS或PBS洗涤3-5次,每次3-5分钟,去除未结合抗体。配制DAB工作液:按比例混合A液(浓缩DAB)...

  • 20259-12
    全机型通用荧光定量试剂如何提升PCR实验效率

    全机型通用荧光定量试剂从试剂配方优化、预混设计以及广泛的仪器兼容性等多方面着手,有效提升了PCR实验的效率,为科研工作者和实验人员节省了宝贵的时间,推动了相关研究和检测工作的快速进展。优化试剂配方,加快反应进程部分全机型通用荧光定量试剂通过定向优化扩增酶性能,能够显著缩短退火延伸时间。以某款试剂为例,在原有技术基础上,其45个扩增循环时间可缩短至20-30分钟,时间节省50%以上。同时,一些试剂采用了抗体修饰的AntiTaqDNA聚合酶,配合qPCRBuffer体系,不仅确保...

  • 20258-15
    无缝克隆试剂盒的使用流程

    无缝克隆试剂盒基于同源重组原理,通过插入片段与线性化载体末端的同源序列(15-25bp)实现定向重组,无需酶切与连接步骤,具有操作便捷、阳性率高(可达95%以上)、支持多片段重组等优势。无缝克隆试剂盒其使用流程可分为以下三个核心步骤:一、线性化载体制备酶切法双酶切:选择载体中两个不同的酶切位点,用限制性内切酶消化载体,通过凝胶电泳分离并回收线性化载体。双酶切可降低载体自连背景,提高阳性率。单酶切:若无可选双酶切位点,可采用单酶切,但需延长酶切时间(2小时至过夜)并进行脱磷处理...

  • 20258-13
    探索GFP琼脂糖的应用与实验价值

    在现代生命科学研究中,绿色荧光蛋白(GFP)因其荧光特性,成为观察生物分子动态的“可视化标签”。而GFP琼脂糖作为将GFP抗体与琼脂糖凝胶结合的亲和介质,正以其高效特异性,在蛋白质纯化、互作分析等领域展现出不可替代的实验价值。GFP琼脂糖的核心优势在于靶向捕获能力。当含GFP标签的重组蛋白混合液流过琼脂糖柱时,凝胶基质上的GFP抗体可精准识别并结合目标蛋白,通过洗涤去除杂蛋白后,仅需改变缓冲液pH值即可实现高效洗脱。这种“一站式”纯化流程不仅将传统方法的多步操作简化为柱层析步...

  • 20258-11
    预染蛋白marker的进阶应用与优势

    随着分子生物学技术的不断发展,预染蛋白Marker在蛋白质分析、分离和鉴定中扮演着越来越重要的角色。预染蛋白Marker是指那些已经通过染料标记的标准蛋白质,在凝胶电泳中用于分子量标定。与传统的未染色Marker相比,它不仅具有便于观察的可视化优势,还在多种实验应用中提供了更高的效率和可靠性。工作原理预染蛋白Marker的基本原理是通过化学染料与蛋白质结合,使得Marker蛋白在凝胶电泳过程中能够被染色并在紫外光下可见。这些蛋白质通常具有已知的分子量和稳定的迁移率,因此它们被...

  • 20258-8
    代氯仿试剂:环保与效率兼备的理想选择

    代氯仿试剂在环保性、安全性和效率方面均优于传统氯仿,是化学实验和工业应用的理想选择。通过技术创新和政策引导,它有望成为绿色化学发展的重要推动力,助力实现更安全、更可持续的未来。氯仿的危害与替代必要性氯仿是一种挥发性有机化合物(VOC),长期接触可能损害肝脏、肾脏和中枢神经系统,并被国际癌症研究机构(IARC)列为2B类致癌物。此外,氯仿在环境中难以降解,可能污染水源和土壤,对生态系统造成长期危害。随着环保法规日益严格(如REACH法规、绿色化学倡议),企业和研究机构亟需寻找更...

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