全机型通用荧光定量试剂如何提升PCR实验效率

 

　　优化试剂配方，加快反应进程

 

　　部分全机型通用荧光定量试剂通过定向优化扩增酶性能，能够显著缩短退火延伸时间。以某款试剂为例，在原有技术基础上，其45个扩增循环时间可缩短至20-30分钟，时间节省50%以上。同时，一些试剂采用了抗体修饰的AntiTaqDNA聚合酶，配合qPCRBuffer体系，不仅确保了在所有Real-TimePCR仪上进行高灵敏的快速qPCR反应，还使得反应时间大幅缩短。还有的试剂中添加了H-Competitor因子，能够竞争氢键、增强双链的打开强度，使试剂对具有复杂高级结构的模板和长片段扩增等具有非常好的适用性，在不影响PCR效果的前提下更快获得结果。

 

　　预混设计，简化加样操作

 

　　为减少实验操作量，许多全机型通用荧光定量试剂采用了预混设计。将诸如UniversalROXPassiveReferenceDye等预混入SYBRMix中，实验人员无需再为不同仪器调整ROX，仅需加入引物与模版即可进行实验。还有的试剂将热启动TaqDNA聚合酶、dNTP、\(Mg^\)、SYBRGreenI、反应缓冲液和稳定剂等试剂预混成即用的2×Mix，使用者在进行PCR反应液配制时，只需加入模板、引物、灭菌蒸馏水便可进行快速Real-TimePCR反应，最大限度地减少了人为误差、降低了污染机率，同时节约了实验操作时间。

 

　　良好的仪器兼容性，适配多种设备

 

　　全机型通用荧光定量试剂的一大关键优势就是对各类仪器的广泛兼容性。不同品牌和型号的荧光定量PCR仪在性能和参数设置上存在差异，但这类试剂经特殊研发，其全新的通用型校正染料具有好延展性，可在多个仪器平台上提供良好的性能表现，无需对浓度使用进行分别的修正过程。无论是ABI、Stratagene、Roche、Bio-Rad还是Eppendorf等各种常见的荧光定量PCR仪，均能适用，真正实现了一台仪器适用多种机型的便捷性，避免了因仪器不同而需频繁更换试剂或调整实验条件的麻烦，大大提升了实验效率。