快速内切酶 ApaI。LabFD™ 快速内切酶是一系列经过基因工程重组的快速限制性内切酶，适用于质粒 DNA、PCR 产物或基因组 DNA 等的快速酶切。 所有 LabFD™ 快速内切酶在通用的LabFD™或LabFD™ Color Buffer中都具有优良的活性，能够在 5~15 分钟内完成酶切。

货号：F7502S

储存条件：-20℃

同裂酶：Bsp120I, PspOMI 

注：同裂酶对于不同的甲基化修饰可能具有不同敏感性。

产品组成

产品简介

LabFD™ 快速内切酶是一系列经过基因工程重组的快速限制性内切酶，适用于质粒  DNA、PCR 产物或基因组  DNA 等的快速酶切。 所有  LabFD™ 快速内切酶在通用的LabFD™或LabFD™ Color Buffer中都具有优良的活性，能够在  5~15 分钟内完成酶切。此外，兰博  利德去磷酸化、连接试剂在LabFD™  Buffer 中均具有  100% 活性，支持一管化反应，提升“酶切-修饰-连接"的体验。

LabFD™ Color Buffer 包括红色和黄色示踪染料，可将产物直接用于凝胶电泳。LabFD™ Color Buffer  的红色染料与 2500 bp  双链DNA 片段在1% 琼脂糖凝胶中迁移速率接近；黄色染料与10 bp双链  DNA  片段在  1% 琼脂糖凝胶中迁移速率接近。

建议反应条件

1×LabFD™缓冲液；37℃温育；参照“DNA快速酶切流程"配制反应体系。

失活条件

80℃温育20min。

质量控制

功能活性检测

37℃下，在20ul反应体系中，1ul LabFD™ ApaI能够在15min内完quan消化1ug p615 DNA。

超长时间温育检测

37℃下，将1ul LabFD™ ApaI与1ug p615 DNA共同温育3h，未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解，更长时间酶切可能出现星号活性。

酶切-连接-再酶切检测

37℃下，使用10 倍酶量的LabFD™ ApaI 消化DNA 底物，回收酶切产物，在 22℃下使用 T4 DNA Ligase (Fast)  可以将超过 95% 的酶切产物重新连接。将连接产物再次回收后，使用相同的内切酶可以重新切开 95% 以上的连接产物。

使用方法

1.DNA快速酶切流程

①在冰上按如下建议的加样顺序配制反应体系：

②轻柔吸打或轻弹管壁以混匀（切勿涡旋），然后瞬时离心以收集挂壁液滴；

③75℃温育15 min（质粒），或30~60 min（基因组 DNA）；

④80℃温育20min即可使酶失活，停止反应（可选）；

⑤如果使用 LabFD™ Color Buffer 进行酶切反应，得到的产物可以直接进行上样电泳。

2.双酶切或多酶切

①每种快速内切酶的用量为1ul，并根据需要适当扩大反应体系；

②所有快速内切酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10；

③如果所用的几种快速内切酶的最适反应温度不同，应先以最适温度低的酶开始酶切，再添加最适温度较高的酶，在其最适反应温度下进行酶切反应。

3.适用于质粒的扩大反应体系

注：如果总反应体系大于20ul，应适当增加温育时间，尽量使用水浴、金属浴或沙浴。

不同DNA中的酶切位点数量

甲基化修饰影响

在不同反应缓冲液中的活性

注：活性数据来自LABLEAD限制酶标准反应体系下的检测。