快速内切酶SphI快速内切酶经过基因工程重组、能够在5~15分钟内精确完成DNA切割的高保真限制性内切酶，适用于质粒DNA、PCR产物或基因组DNA等的快速酶切。快速内切酶具有如下特点：5~15分钟内即可完成酶切；共用一种酶切Buffer，大大简化酶切反应体系；良好的酶活冗余度，轻松应对底物过量或困难模板酶切。

SphI 快速内切酶

产品货号：F5575S

储存条件：-20℃                                              

同裂酶：BbuI, PaeI, SpaHI

产品组成

产品简介

LabFD™快速内切酶是一系列经过基因工程重组、能够在5~15分钟内精确完成DNA切割的高保真限制性内切酶，适用于质粒DNA、PCR产物或基因组DNA等的快速酶切。LabFD™快速内切酶具有如下特点：5~15分钟内即可完成酶切；共用一种酶切Buffer，大大简化酶切反应体系；良好的酶活冗余度，轻松应对底物过量或困难模板酶切。此外，LABLEAD去磷酸化、连接试剂在LabFD™酶切Buffer中具有baifenzhibai活性，支持一管化反应，提升“酶切-修饰-连接"的体验。

建议反应条件

1×LabFD™缓冲液；

37℃温育；

参照“DNA快速酶切流程"配制反应体系。

失活条件

80℃温育 20 min。

质量控制

功能活性检测

最shi反应温度下，在20ul反应体系中，1ul LabFD™ SphI能够在15min内*消化1ugλDNA。

超长时间温育检测

最shi反应温度下，将1ul LabFD™ SphI与1ugλDNA共同温育3h，未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解，延时酶切可能出现星号活性。

酶切-连接-再酶切检测

最shi反应温度下，使用1ul LabFD™  SphI消化底物，回收酶切产物。在22℃下使用适量Fast T4 DNA Ligase可以将酶切产物重新连接。将连接产物再次回收后，使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。

非特异性内切酶活性检测

最shi反应温度下，将1ul LabFD™ SphI与1ug超螺旋质粒DNA共同温育4h，使用琼脂糖凝胶电泳检测，质粒DNA仍然处于超螺旋状态。

蓝白斑检测

将含有单一lacZα基因的载体以1ul LabFD™ SphI消化，重新连接后转化入大肠杆菌感受态细胞，涂布在含有对应抗生素、IPTG和X-gal的LB培养基平板上。连接正确的产物会生长出蓝色菌落，而连接错误（即DNA末端切口不完整）的产物将得到白色菌落。对于LabFD™系列限制酶而言，白色菌落比例应小于1%。