Hoechst33258是可透过细胞膜并对DNA染色的细胞核染色试剂，在嵌入双链 DNA 后释放强烈的蓝色荧光。Hoechst 33258常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33258-DNA 的激发和发射波长分别为 350nm 和 460nm。

Hochest 33258 染色液

 产品货号：B2884

存储条件：-20℃避光保存，有效期一年。

产品描述

Hoechst 33258是可透过细胞膜并对DNA染色的细胞核染色试剂，在嵌入双链 DNA 后释放强烈的蓝色荧光。Hoechst 33258常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33258-DNA 的激发和发射波长分别为 350nm 和 460nm。

产品性质

使用方法

1、对于固定的细胞或组织：

1)对于细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33258染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33258染色。

2)对于贴壁细胞或组织切片，加入少量Hoechst 33258染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积3倍的染色液，并混匀。室温放置 3-5 min。

3)吸除Hoechst 33258染色液，用TBST、PBS 或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5min。

4)直接在荧光显微镜下或封片后荧光显微镜下观察。观察细胞凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。         

2、对于活细胞或组织：

5)加入适当量Hoechst 33258染色液，必须充分覆盖住待染色的样品，通常对于六孔板一个孔需加入1ml 染色液，对于96孔板一个孔需加入100ul染色液。

6)在适宜于细胞培养的温度培养20-30min。弃染色液，用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。

注意事项

1)Hoechst 33258 对人体有一定刺激性，请注意适当防护。

2)荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。

3)为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

4)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。