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一文读懂不同活性氧检测试剂盒的工作原理

更新时间:2025-11-17点击次数:0
   不同活性氧检测试剂盒基于不同的检测原理,各有其特点和适用范围。在实际应用中,需要根据实验目的、样本类型以及检测条件等因素综合考虑,选择合适的试剂盒,以准确检测活性氧水平,为相关研究提供可靠的数据支持。活性氧(ROS)是生物体内一类具有高活性的含氧化合物,包括超氧阴离子、过氧化氢、羟基自由基等。它们在细胞信号传导、免疫防御等生理过程中发挥重要作用,但过量产生会导致氧化应激,损伤细胞成分,与多种疾病的发生发展密切相关。因此,准确检测活性氧水平对研究细胞生理病理机制意义重大,而活性氧检测试剂盒就是常用的检测工具,不同试剂盒工作原理有所不同。
 
  化学发光法检测试剂盒
 
  这类试剂盒主要基于活性氧与特定化学发光物质发生反应产生光子的原理。例如,常见的鲁米诺在活性氧(如过氧化氢,在辣根过氧化物酶的催化下)作用下,会发生氧化反应,反应过程中产生激发态的中间体,当这些中间体回到基态时,就会释放出光子。通过检测光子的强度,就可以间接反映活性氧的含量。光子强度与活性氧的浓度在一定范围内成正比,利用专门的发光检测仪器测量光子信号,经过标准曲线校准后就能确定样本中活性氧的水平。
 
  荧光法检测试剂盒
 
  荧光法是应用较为广泛的检测方式。其原理是利用能与活性氧特异性结合的荧光探针。这些探针本身没有荧光或者荧光较弱,当与活性氧发生反应后,探针的化学结构发生改变,从而产生荧光或者荧光强度发生变化。比如,二氯二氢荧光素二乙酯(DCFH-DAE)是一种常用的检测活性氧的荧光探针,它本身无荧光,进入细胞后被细胞内的酯酶水解成DCFH,DCFH无荧光,但可被活性氧氧化成荧光物质DCF,荧光强度与活性氧的量相关。通过荧光显微镜、流式细胞仪或荧光分光光度计等设备检测荧光信号的强弱,进而对活性氧进行定量或定性分析。
 
  比色法检测试剂盒
 
  比色法检测试剂盒依据活性氧与特定显色剂反应产生颜色变化的特性来检测。当活性氧与显色剂作用时,会使显色剂的颜色发生深浅变化,这种颜色变化与活性氧的含量存在对应关系。例如,某些试剂盒中的显色剂在与过氧化氢反应后,会生成有色产物,通过使用分光光度计测量溶液在特定波长下的吸光度,再根据预先绘制的标准曲线,就可以计算出样本中活性氧的浓度。这种方法操作相对简单,不需要昂贵的检测设备,适合一些对检测条件要求不高的场合。